نوع مقاله : مقاله پژوهشی
نویسنده
گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه محقق اردبیلی، اردبیل
چکیده
زمینه و هدف بیماریهای حاصل از عفونت با انگل لیشمانیا از عوامل مهم ایجاد مشکلات بهداشتی در بسیاری از نقاط دنیا بهویژه در کشورهای درحالتوسعه بهشمار میروند. آنتیبادیهای مونوکلونال، بهعنوان ابزاری باارزش برای تشخیص، درمان و تعیین ویژگی شاخصهای آنتیژنی انگلها بهکار گرفته شدهاند. هدف از این مطالعه، بررسی تکنیکهای کاربردی تهیه آنتیبادیهای مونوکلونال علیه لیشمانیا اینفنتوم سویه ایرانی است.
مواد و روشها سویههای استاندارد لیشمانیا اینفنتوم کشت داده شدند و از آنتیژن آنها استفاده شد. موشهای BALB/c دو بار توسط آنتیژن به همراه مواد یاور فروند، داخل صفاقی تزریق شدند. سه روز قبل از ادغام سلولی، آنتیژن از طریق وریدی به موشها تزریق شد. لنفوسیتهای طحال موشها با میلوما SP2/0 ادغام شدند و سپس با روش limiting dilutionجداسازی مونوکلونها انجام گرفت.
یافتهها شانزده مونوکلونال آنتیبادی، علیه پروماستیگوت لیشمانیا اینفنتوم بهدست آمد که سه مورد از آنها OD بیش از یک نانومتر را نشان داد و 5D2FV، 4G5FVو 5D6FIVنامیده شدند و سپس آنتیبادیهای ضدانگل لیشمانیا اینفنتوم از هیبریدهای بهدستآمده، حاصل شد. این آنتیبادیها در فاز لگاریتمی انگل، مؤثرند.
نتیجهگیری به نظر میآید که این آنتیبادیها میتوانند در برابر سویه ایرانی پروماستیگوت لیشمانیا اینفنتوم واکنش نشان دهند و در تشخیص بیماری کالاآزار استفاده شوند.
کلیدواژهها
موضوعات
عنوان مقاله [English]
Preparation of Monoclonal Antibodies against proamastigote Leishmania infantum strain in Iran
نویسنده [English]
- Ezzat Nourizadeh
Department Dpartment of Microbiology, College of Science , University of Mohaghegh Ardabili, Ardabil, Iran
چکیده [English]
Introduction: Leishmania parasitic infections are the important causes of health problems in many parts of the world, especially in developing countries. Monoclonal antibodies have been used as valuable tools for the detection, treatment and characterization of the antigenic markers of parasites. This study through applicable techniques aims to produce mAbs against Iranian type of Leishmania( L). infantum. Materials and Methods: Standard strains were cultured and their antigens were used. BALB/c mice were injected with freeze-thawed promastigote twice together with Freund adjuvant. Three days before cell-fusion, the antigen through vein was injected into the mice. Then the mice were killed. After that their spleen lymphocytes were mingled with myeloma SP2/0. In the next step, the isolation of monoclones was performed by limiting dilution method.
Results: 16 mAb against promastigote form of L.infantum parasite were obtained ,3 of which showed optical density (OD) more than 1nm, designated as 5D2 FV, 4G5 FV and 5D6 FIV. Then, anti-promastigotes L.infantum mAbs were obtained from these hybrids. These antibodies are effective in the logarithmic phase of the parasite.
Conclusion: It seams these antibodies can demonstrate reaction against Iranian strain of promastigotes L. infantum and can be employed in the diagnosis of kalazar disease
کلیدواژهها [English]
- Antigens
- Monoclonal Antibodies
- Proamastigote
- Leishmania Infantum
[7]. Mcgwire B C , a.r. Satoskar A R. Leishmaniasis: clinical syndromes and treatment. An International Journal of Medicine . 2013; 107:7–14.
[20]. Nejad-Moghaddam A, Abolhassani M. Production and characterization of monoclonal antibodies recognizing a common 57-kDa antigen of Leishmaniaspecies. Iran Biomed J. 2009; 13:245-51.