محمد محمدزاده وردین؛ مهین نیکوگفتار ظریف؛ احمد قره باغیان؛ ناصر امیری زاده؛ مهریار حبیبی رودکنار؛ محسن سقاء؛ شهرام وائلی
دوره 21، شماره 5 ، آذر و دی 1393، ، صفحه 876-884
چکیده
زمینه و هدف: به منظور ارتقای کیفیّت پیوند سلولهای بنیادی خون ساز، روشهای پردازش متعدّدی به کار میروند. هدف این مطالعه مقایسه سه روش پردازش متداول هیدروکسی اتیل استارچ، سانتریفیوژ ساده و نیز سامانه خودکار سپکس بود.
مواد و روشها: تعداد 90 نمونه خون بند ناف توسّط روشهای هیدروکسی اتیل استارچ، سانتریفیوژ ساده و نیز سامانه خودکار ...
بیشتر
زمینه و هدف: به منظور ارتقای کیفیّت پیوند سلولهای بنیادی خون ساز، روشهای پردازش متعدّدی به کار میروند. هدف این مطالعه مقایسه سه روش پردازش متداول هیدروکسی اتیل استارچ، سانتریفیوژ ساده و نیز سامانه خودکار سپکس بود.
مواد و روشها: تعداد 90 نمونه خون بند ناف توسّط روشهای هیدروکسی اتیل استارچ، سانتریفیوژ ساده و نیز سامانه خودکار سپکس پردازش شدند. سپس میزان شمارش سلولهای هسته دار، CD34 مثبت و کلنی زایی آنها، اندازه گرفته شد. در پایان، نتایج با استفاده از آزمون آماری تحلیل واریانس یک طرفه تحلیل شدند و مقدار p کم تر از 0.05 به عنوان معنی دار در نظر گرفته شد.
یافتهها: میزان بازیافت سلولهای هسته دار در استفاده از روشهای هیدروکسی اتیل استارچ، سانتریفیوژ ساده و نیز سامانه خودکار سپکس، به ترتیب 76%، 71% و 80% بود (05/0p>). میزان بازیافت سلولهای CD34 مثبت در استفاده از روش خودکارسپکس 91% و در دو روش دیگر 85% بود (05/0p>). همچنین تفاوت معنی داری بین سه روش از نظر میزان بازیافت کلنی زایی نیز دیده نشد (05/0p>).
نتیجه گیری: شمارشهای سلولهای هسته دار، CD34 مثبت و کلنی زایی نمونه های خون بند ناف پردازش شده با سه روش مختلف، تفاوت معنی داری باهم نداشتند.
مهشید محمدی پور؛ کاظم پریور؛ محمدعلی شکرگزار؛ ناصر مسروری؛ احمد رضا کامیاب؛ راحله حلبیان؛ مهریار حبیبی رودکنار
دوره 15، شماره 3 ، مهر و آبان 1387، ، صفحه 152-157
چکیده
زمینه و هدف: فاکتور VII یکی از عوامل انعقادی مهم در مسیر خارجی انعقاد خون است که می تواند با فعال کردن FX نیاز بیماران هموفیل را به فاکتورهای VIII و IX رفع نماید. بیان نو ترکیب این فاکتور مشکلات موجود در تهیه فاکتور های مذکور از پلاسما (با توجه به میزان اندک آن ها) و همچنین خطر انتقال بیماری های خونی را برطرف می سازد. لذا هدف از این پژوهش بیان ...
بیشتر
زمینه و هدف: فاکتور VII یکی از عوامل انعقادی مهم در مسیر خارجی انعقاد خون است که می تواند با فعال کردن FX نیاز بیماران هموفیل را به فاکتورهای VIII و IX رفع نماید. بیان نو ترکیب این فاکتور مشکلات موجود در تهیه فاکتور های مذکور از پلاسما (با توجه به میزان اندک آن ها) و همچنین خطر انتقال بیماری های خونی را برطرف می سازد. لذا هدف از این پژوهش بیان فاکتور مذکور به صورت نو ترکیب و در سطح بالا با استفاده از فناوری Gateway و TOPO cloning می باشد.
مواد و روش ها: در این تحقیق تجربی، cDNA فاکتور VII از رده سلولی کبدی HepG2 به کمک PCR جدا شد و سپس با تکنیک TOPO Cloning ژن مورد نظر در ساختمان ناقل پروکاریوتی قرارگرفت. ناقل نوترکیب پس از غربالگری برای کلونی های باکتریایی استخراج و از آن برای انجام واکنش نوترکیبی LR با ناقل بیانی باکولوویروس در فناوری Gateway استفاده شد. ویروس نوترکیب به میزبان حشره انتقال و پس از غربالگری های لازم بیان پروتئین بررسی گردید. نتایج آنالیز بیان پروتئین با الایزا به صورت تکرار سه تایی (انحراف معیار ± میانگین) ارایه و تفاوت بین گروه ها با استفاده از آزمون آماری تی استیودنت تحت نرم افزار SPSS مورد مطالعه قرار گرفت.
یافته ها: نتایج حاصل از تست PCR برای واکنش های کلونینگ و نو ترکیبی همگی حاکی از کلونینگ ژن فاکتور VII با بازدهی بیش از 90 درصد در ساختار ناقل های مورد استفاده بودند. آنالیز های انجام شده برای بیان پروتئین توسط الایزا، SDS-PAGE و وسترن بلات بیان بالای این فاکتور را (30 mg/mL) تایید نمودند. نتایج حاصل از آنالیز الایزای نمونه های کشت آلوده تفاوت معناداری را با کنترل منفی نشان می دادند (P